1文章简介
从催吐萝芙木(RauvolfiaVomitoria)地上部分分离得到两个罕见的降单萜吲哚生物碱rauvomineA(1)和rauvomineB(2)，以及两个已知化合物perakine(3)和alstoyunineA(4)。通过光谱分析、单晶X射线衍射和电子圆二色谱(ECD)计算，确定了1和2的结构。化合物2是一种新的C18降单萜类吲哚生物碱，被环丙烷环取代，形成不寻常的6/5/6/6/3/5六环重排环系。随后提出了可能的生物合成途径1和2。并对两种化合物进行活性测试，其中化合物2具有显著的抗炎活性。
2提取分离
将催吐萝芙木的地上部分(2.5Kg)粉碎并用甲醇提取，提取物(g)在乙酸乙酯和5%H2SO4溶液(pH=3)中溶解。将用5%NaOH溶液调节pH值至10的水溶性物质，用CHCl3萃取。CHCl3提取物(20g)经MCI凝胶、硅胶、SephadexLH-20、ODS和制备高效液相色谱分离纯化，得到化合物1?4。
3结构鉴定
化合物1为无色晶体，分子式C18H19ClN2O，红外光谱中的强吸收峰表明存在羰基(cm-1)和NH(cm-1)基团。紫外光谱中在最大吸收和nm处有紫外吸收说明存在吲哚发色团。1H和13CNMR谱信号显示了吲哚部分信号在δH7.46(1H，d，7.6Hz，H-9)，7.29(1H，d，7.6Hz，H-12)，7.15(1H，dd，7.6，7.6Hz，H-11)和δH7.09(1H，dd，7.6，7.6Hz，H-10)；δC.4(C-13)、.1(C-2)、.6(C-8)、.9(C-11)，.7(C-10)，.4(C-9)，.8(C12)，和δC.8(C-7)、.4(C-13)、.1(C-2)、.6(C-8)。除了吲哚环信号外，生物碱还含有一个甲基(δC15.8)，两个亚甲基(δC34.0，27.8)，六个次甲基(δC61.5，55..9，49.4，45.2，34.1)和一个醛基(δC.3)。1H-1HCOSY显示出CH?CH2?CH(?CH?CH?CH2)?CH?CH?CH3自旋系统。在HMBC谱中，δH3.08(1H，dd，15.8，4.9Hz，H-6a)和2.77(1H，dd，15.8，1.4Hz，H-6b)与δC.1(C-2)，.8(C-7)以及.6(C-8)的相关可以表明，?CH2(δC27.8，C-6)基团连接在C-7处的吲哚环上。根据上述的谱图信息，可以确定自旋系统为CH-3?CH2-14?CH15(?CH-16?CH-5?CH2-6)?CH-20?CH-19?CH3-18单元。H-5、H-15、H-16与C-17(δC.3)相关及H-17与C-5、C-16相关将醛基官能团定位在C-16上。此外，H-3/C-5，H-5/C-3、C-19，H-19/C-3、C-5相关表明三个碳C-3(δC51.9)，C-5(δC45.2)和C-19(δC55.8)和N原子相连，氯原子只能位于C-20(δC61.5)。因此，确定了1的平面结构。
Figure1.Key(a)1H?1HCOSY(red),HMBC(H→C),and(b)NOESYcorrelationsof1.
在NOESY谱中H-3/H-14α、H-3/H-19、H-14α/H20和H-5/H-18相关表明H-3、H-19和H-20是α取向的，Cl-20和CH_3-18是β取向的六元环(C-3?C-14?C-15?C-20?C-19?N-4?C-3)。单晶X射线衍射分析，确认了1的绝对构型，为3S,5S,15R,16R,19S,20S。
Figure2.X-raycrystallographicstructureof1.
RauvomineB，其红外光谱具有羰基(cm?1)和吲哚发色团环(、、cm?1)的特征吸收带。紫外光谱证实了在和nm处有吲哚发色团环的存在。1HNMR和13CNMR信号在δH7.48(1H，d，7.4Hz，H-9)、7.26(1H，d，7.4Hz，H-12)、7.12(1H，dd，7.4，7.4Hz，H-11)和7.09(1H，dd，7.4，7.4Hz，H-10)表现出吲哚片段的特征；δC.9(C-2)，.3(C-13)，.2(C-8)，.7(C-11)，.6(C-10)，.4(C-9)，.0(C-12)和.9(C-7)。2的HSQC谱表明该生物碱含有一个甲基(δC18.6)，两个亚甲基(δC23.9，20.7)，五个次甲基(δC57.8，50..5，32..2)，一个季碳(δC43.3)和一个醛基(δC.8)。HMBC谱中，从H-6到吲哚骨架碳[δC.9(C-2)，.9(C-7)和.2(C-8)]的相关信号表明?CH2(δC20.7，CH2?6)与C-7相连，并且亚基ii被指定为CH-5?CH2-6。H-3与吲哚骨架碳δC.9(C-2)和.9(C-7)的相关表明?CH(δC50.2，C-3)与C-2相连接，因此，片段iii就可以很容易归属于C-2?CH-3?CH2-14?CH-15?CH-20?CH-19?CH3-18。H-15和H-20与C-17，H-6，H-14，H-15和H-19与C-16，H-17与C-5，C-15和C-16的HMBC关联表明，C-5，C-15，C-17和C-20通过C-16连接。CH-15，C-16和CH-20的13CNMR化学位移分别为δC21.2，43.3和32.7，而且3JH-15，H-20为8.4Hz，表现出1，1，2，3-四取代环丙烷信号。此外，在HMBC谱中，从H-3到C-5，从H-5到C-3和C-19，从H-19到C-3和C-5。由此2的平面结构的建立。
Figure3.Key(a)1H?1HCOSY(red),HMBC(H→C),and(b)NOESYcorrelationsof2.
NOESYR谱表明，H-3、H-19和H20在六元环(C-3?C-14?C-15?C-19?N-4?C-3)中是β取向的。ECD计算确定了B的绝对构型，为3S,5S,15S,16R,19S,20R。
Figure4.Experimental(blackline)andcalculated(redline)ECDspectraof2inMeOHandcalculated(blueline)ECDspectrumofitsenantiomer.
4合成途径推测
1-4可能的生物发生途径如方案1所示。色氨酸和secologanin转化为Ⅰ的可能性很大。14，15-Ⅰ通过烯醇化异构化生成Ⅲ，15和Ⅲ通过部分还原和分子内羟醛缩合反应生成吡啶型生物碱3，16，17和Ⅲ还可以与甲醇反应生成4。鉴于此，作者认为1和2也是由中间体烯醇Ⅱ氧化生成的。化合物1是通过用氯原子取代Ⅵ中的羟基而形成的，而Ⅵ的分子内环化可以得到化合物2。
5活性测试
采用MTT法检测分离的4个化合物对7种癌细胞SMMC-7、HepG2、HT-29、SW、A-、HeLa和MCF-7的细胞毒作用。不幸的是，没有一种化合物对癌细胞有明显的抑制作用。仅4对HT-29(IC50=35.2μM)和SW(IC50=45.3μM)有较弱的细胞毒作用，金诺芬阳性对照IC50分别为2.5和3.9μM。此外，对四个化合物的抗炎活性进行了评估。化合物2对巨噬细胞.7有明显的抑制作用，IC50值为39.6μM，其余3个化合物均有一定的抗炎活性。
6总结
作者对催吐萝芙木的地上部分进行了植物化学研究，得到两个新的单萜类吲哚生物碱：RauvominesAandB。其中化合物1是一种新的含氯原子的C18sarpagine型降单萜类吲哚生物碱。，化合物2拥有特殊的6/5/6/6/3/5六环重排环系，报道了这些生物碱的分离、结构表征、生物活性及其可能的生物发生途径。这两种新化合物为接下来的研究提供思路，而且丰富了对降单萜类吲哚生物碱的认识。
本文于年8月4日在线发表于ACS旗下期刊OrganicLetters。
曾军为第一作者，高坤教授为通讯作者，通讯单位为兰州大学。
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